《表1 引物设计：Klotho基因与新疆地区维吾尔族、汉族特发性草酸钙肾结石的相关性》

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《Klotho基因与新疆地区维吾尔族、汉族特发性草酸钙肾结石的相关性》

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检索美国国立生物技术信息中心（NCBI）公共数据库中Klotho基因序列。引物设计见表1，取质检合格的基因组DNA，配置PCR反应液，配制好的反应体系在PCR仪（BioRad，USA）中按以下反应条件进行扩增。扩增条件：（1）94℃预变性3min 1个循环；（2）94℃变性30s；（3）55℃退火30s；（4）72℃延伸60s；重复第2～4步38个循环；（5）72℃变性5 min 1个循环；（6）4℃持续；配制1%琼脂糖凝胶，室温放置5min后加入0.3μL染色液，混匀倒入胶槽，凝固待用。上样于1%琼脂糖凝胶孔中，120V恒压电泳30min，电泳完毕后使用凝胶成像仪（BioDoc-IT Imaging System）在成像系统中判断酶切结果，并将PCR产物进行测序。