《表5 巨大芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌生产的青霉素G酰化酶(不完全)》

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《不同芽孢杆菌属重组生物药物的制备及前景展望》

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青霉素G酰化酶（Pac，EC 3.5.1.11）可催化青霉素G和头孢菌素G裂解为生产半合成β-内酰胺类抗生素的重要中间体。Pac由一个小的α亚基（27KDa）和一个大的β亚基（59KDa）组成，由含有信号肽和间隔肽的单链多肽的前体自身催化生成。在芽孢杆菌属中，巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌可用于各种表达系统以及主要是复合培养基重组生产Pac。突变体中，巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶（BmPac）的生产可高达20.4U/mL、枯草芽孢杆菌MI 113中达5.8U/mL；主要胞外蛋白酶、木糖代谢缺陷型菌株巨大芽孢杆菌YYBm1，使用木糖诱导型质粒系统，BmPac产量最多可分别达到47U/mL（微孔板）、1.5U/mL（摇瓶）、1.25U/mL（实验室搅拌生物反应器）。枯草芽孢杆菌噬菌体Phi105在温度敏感表达系统中，摇瓶中分泌2.55U/mL，在连续生物反应器中2.7U/mL，在三相流化床鼓泡塔中可达4U/mL。采用生物反应器中的间歇培养方法，重组的6种蛋白酶缺陷株枯草芽孢杆菌WB 600，粪产碱菌可分泌378U/mL的Pac（AfPac）；具有位点定向突变（BmPacb24F）的菌株可分泌0.92U/mL的BmPac（BmPacb24F）。使用相同的菌株，在补料分批培养中分泌可高达1960U/mL的粪产碱菌青霉素G酰化酶（AfPac）。用其它重组枯草杆菌菌株或质粒系统，可分泌2.2U/mL的粘节杆菌青霉素G酰化酶（AvPac）和0.26U/mL或42U/mL的巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶（BmPac），见表5。