《表1 摇床封闭孵育CYP3A4检测条件》

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《CYP3A4和CYP1A2及CYP2E1快速免疫印迹检测方法的建立》

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（1）以CYP3A4为对象，优化摇床封闭孵育条件，制备10%的SDS-PAGE常规凝胶和免染胶。取30μg蛋白样品与预染Marker上样，80 V恒压20 min，电压调至120 V，继续电泳70 min；电泳结束后，由下往上按照滤纸、PVDF膜、胶及滤纸的顺利搭建转膜“三明治”，并置于快速转膜仪中转膜；转膜结束后，封闭孵育及分组见表1。（2）优化CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1的Western blot快速孵育仪封闭孵育条件:制备10%的SDS-PAGE常规凝胶，同前述进行电泳分离，快速转膜仪转膜30 min，封闭孵育及分组见表2。抗体孵育完毕后，在PVDF膜上加ECL发光混合液1 m L，室温反应1 min后放入凝胶成像仪器成像。