《表1 流动相组成及梯度洗脱条件》

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《基于水翁花中查尔酮分离分析的药学综合实验设计》

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（1）制备样品：准确称取纯化的DMC 100 mg于100 m L量瓶中，加乙醇稀释至刻度作为对照品溶液。准确称取约2.0 g水翁花粗粉于10 m L甲醇，超声10 min，过膜，得待测品溶液。（2）UV含量测定：DMC紫外光谱全波段扫描显示其在340 nm处有最大吸收。用移液管分别吸取0.50、1.00、1.50、2.00、2.50m L对照品溶液于10 m L容量瓶，定容，在340 nm处以无水乙醇作为对照，测定吸光度（A），以吸光度为纵坐标，浓度c（mg/m L）为横坐标，绘制标准曲线。取供试品溶液，于340 nm处测定吸光度，按回归方程计算含量。（3）UPLC含量测定：色谱柱BEH-C18柱（2.1 mm×100 mm，1.7μm）；流动相及梯度洗脱条件见表1；柱温30℃，进样体积2μL，监测波长340 nm。取对照品溶液，以峰面积为纵坐标，浓度c（mg/m L）为横坐标绘制标准曲线。供试品溶液，通过峰面积，按回归方程计算含量。（4）结果与讨论：按照上述方法进行预实验，平行3组测定。学生所得UPLC方法所得色谱图如图4所示，标准曲线为y=16850496.00 x+2267654.20（R2=0.991 9），计算得水翁花中DMC含量为0.430%±0.015%。UV法所得标准曲线为y=0.0599 x+0.014 3（R2=0.997 1），计算得水翁花中DMC含量为1.665%±0.289%。