《表5 人参总皂苷对PC12衰老细胞中Nrf2、HO-1蛋白表达的影响（±s,n=3)》

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《人参总皂苷对D-半乳糖致PC12细胞衰老的改善作用及其机制研究》

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注：与正常对照组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05，##P<0.01；与阳性对照组比较，ΔΔP<0.01

采用Western blotting法检测。按“2.4”项下方法分组、培养。培养24 h后，按“2.10”项下方法提取细胞总蛋白。采用细胞核蛋白抽提试剂盒按说明书提取核蛋白，检测氧化损伤相关蛋白Nrf2、HO-1表达，一抗稀释比例为1∶1 000，二抗稀释比例为1∶10 000，另设阳性药物组和阳性对照组进行比较。阳性药物组细胞用含5mmol/L NAC的完全培养液培养1 h，阳性对照组细胞先用含5 mmol/L NAC的完全培养液培养1 h，再用含20mg/m L D-半乳糖的完全培养液培养24 h。以Nrf2与Lamin B的灰度值比值表示细胞核内Nrf2蛋白的表达水平，以HO-1与GAPDH的灰度值比值表示细胞内HO-1蛋白的表达水平。试验重复3次。结果，与正常对照组比较，模型组细胞核内Nrf2蛋白的表达水平显著升高（P<0.05）。与模型组比较，阳性对照组和人参总皂苷低、高浓度组细胞核内Nrf2与细胞内HO-1蛋白的表达水平均显著升高（P<0.05或P<0.01），且人参总皂苷低、高浓度组Nrf2蛋白的表达水平略高于阳性对照组（P>0.05)，HO-1蛋白的表达水平显著高于阳性对照组（P<0.01），推测人参总皂苷激活Nrf2信号通路可能是由ROS介导的，详见图7、表5。