《表1 mi R-6775-3p与细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶CDK4和CDK6，以及细胞侵袭转移相关指标MMP17和MMP24的结合位点》

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《miR-6775-3p在乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响》

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为探究mi R-6775-3p抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的分子机制，本研究采用Target Scan在线数据库预测得出，mi R-6775-3p与细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶CDK4和CDK6，以及细胞侵袭转移标志物MMP17和MMP24的3’UTR存在结合位点（表1）。为验证上述结合位点的活性，我们接下来采用RTFQ-PCR法检测MDA-MB-453细胞转染mi R-6775-3p mimics后CDK4、CDK6、MMP17和MMP24的m RNA表达变化，结果如图5A所示，转染mi R-6775-3p mimics的MDA-MB-453细胞中CDK4、CDK6、MMP17和MMP24 m RNA的表达水平均比对照组明显下降（P<0.01）。采用Western blot实验检测CDK4、CDK6、MMP17和MMP24蛋白表达的变化，结果显示，转染mi R-6775-3p mimics的MDA-MB-453细胞中CDK4、CDK6、MMP17和MMP24蛋白的表达水平均比对照组明显下降（P<0.01，图5）。