《表1 语料库统计:肺纤方对VEGFR2介导的肺成纤维细胞α-SMA、ColⅠ表达的影响》

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《肺纤方对VEGFR2介导的肺成纤维细胞α-SMA、ColⅠ表达的影响》


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细胞以1×108/L的密度接种于6孔细胞培养板中,每孔1.5m L细胞悬液,于培养箱中培养24h,吸弃原培养液。将成纤维细胞随机分为6组,除空白对照组外,其余5组均加入含浓度为20mg/L的VEGFR2干预24h。泼尼松组加入含终浓度为50mg/L的泼尼松维持液1.5m L。肺纤方高、中、低剂量组分别加入含终浓度为100、25、6.25mg/L的肺纤方1.5m L,培养24h后,终止反应。Trizol法提取总RNA,实验操作按说明书进行。紫外分光光度计测定RNA溶液浓度和纯度。若符合要求将RNA逆转录为c DNA循环进行扩增。引物序列设计由北京Invitrogen公司合成,具体见表1。PCR反应条件为:95℃30s;95℃5s,60℃40s,共40个PCR循环。最后采用2-ΔΔCT法进行数据的相对定量分析。