《表1 供试引物序列：土壤消毒结合施用生物有机肥对西瓜病土改良效果的影响》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《土壤消毒结合施用生物有机肥对西瓜病土改良效果的影响》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

土壤在提取DNA前置于-20℃保存。采用PowerMax?DNA试剂盒（MO BIO Laboratories，Inc.，USA）提取土壤DNA，0.5 g土壤所提取的DNA溶于100μl洗脱溶剂中。尖孢镰刀菌、真菌和细菌数量采用CFX-96实时荧光定量PCR仪（ABI 7500，Applied Biosystems，USA）测定。荧光定量PCR扩增体系为2μl土壤DNA模板，10μl SYBR Premix Ex Taq，10μmol/L正反引物各1μl（尖孢镰刀菌为ITS1F和AFP308，细菌为Eub338和Eub518，真菌为ITS1f和5.8s，表1），6μl无菌去离子水。尖孢镰刀菌反应条件为95℃预变性2 min，95℃变性10 s，58℃退火15 s，72℃延伸20 s，40个循环；真菌和细菌反应条件为95℃预变性2 min；95℃变性10 s，53℃退火20 s，72℃延伸30 s，40个循环。在每一循环的退火阶段采集荧光信号，实时检测并且记录荧光信号的变化，反应结束后制作扩增产物的熔解曲线。建立尖孢镰刀菌、真菌和细菌标准曲线，计算土壤中尖孢镰刀菌、真菌和细菌数量。