《表2 HPLC流动相梯度组成》

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《基因组挖掘指导下的新颖Ⅰ型羊毛硫肽合成基因簇的解析及其异源表达体系的构建》

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将验证的异源表达的阳性接合子在ISP2培养基中进行50 mL的液体小量发酵（不添加抗生素），发酵时间120 h，对发酵液冻干粉用甲醇超声辅助提取三次，旋转蒸发仪浓缩干燥，2 mL色谱甲醇充分溶解，0.22μm滤膜过滤，获得粗提物样品。采用纸片琼脂扩散法（纸片直径6 mm）对其抗藤黄八叠球菌和枯草芽孢杆菌的活性进行检测，粗提物浓度为25μL/纸片；对阳性异源表达株的次级代谢图谱在214 nm下进行HPLC检测，HPLC检测方法如下：流动相A:乙腈，流动相B:0.1%甲酸水溶液；色谱柱为AQ-C18 column（5μm，4.6×250 mm）；流速为1 mL/min；液相色谱为Waters 2695。检测条件如表2。