《表2 不同检测技术对田间疑似橡胶树褐根病的检出频率比较》

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《橡胶树褐根病病菌LAMP快速检测方法的建立及应用》


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√:检测出;×:未检测出

选用来自海南儋州、东方和云南勐腊等地的样本共20份(表2),样本有变褐或变黑坏死的茎基部、根组织,有病根表皮变褐木质部或横切面可见鱼网状单线或蜂窝状褐纹,有橡胶树褐根病菌无柄半圆形黄褐色或黑褐色子实体。采用常规PCR法、基于环介导等温扩增技术LAMP方法和分离培养法对20份样品进行分析诊断。对发病的根状茎基部、根组织及子实体,取病健交界处剪碎,75%酒精+0.01%升汞进行表面消毒;所有分离物均于PDA培养基上28℃培养48 h后挑取组织周围长出的白色菌丝进行纯化培养,同时将上述剪碎的样品利用天根(北京)植物组织基因组DNA试剂盒提取病根组织DNA。以橡胶树健康植株基因组DNA为对照,进行普通PCR和LAMP扩增,普通PCR扩增使用了2组引物,分别是ITS1/ITS4、F3/B3,反应体系与方法同1.2.5.2;LAMP使用引物F3/B3和FIP/BIP,反应体系与方法同1.2.3。