《表2 乙酰溴法测定木质素标准曲线》

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参照古湘的方法[30]，采用乙酰溴法测定果实汁胞中木质素的含量.量取97%的乙酰溴（麦克林，AR级）25.78 mL、冰醋酸（沪试，AR级）74.22mL于通风橱迅速混合储存于棕色试剂瓶中，配置成25%乙酰溴/乙酸（V/V）溶液.用万分之一天平（Mettler Toledo，EL204型）精确秤取50 mg标准木质素（Sigma，AR级），溶于25%乙酰溴/乙酸（V/V）中，配置成浓度为1 mg/mL的母液.根据表2，按照1-7编号量取相应的母液和试剂分装到7个10 mL棕色容量瓶中，用冰醋酸定容到10 mL，摇匀后分装到10 mL离心管中.以表2中1号管为空白管，用紫外分光光度计（HITACHI，U-2900型）于与280 nm处测吸光值.用Excel处理获得数据，得到木质素浓度的回归方程为y=7.329x+0.0034，R2=0.9891，y为280 nm处吸光值，x为木质素浓度.将果实汁胞至于70℃烘箱烘干至恒重后研磨成粉末，秤取50 mg粉末至于10 mL离心管中，分别用2 mL去离子水、2mL 95%乙醇、2 mL丙酮和2 mL乙醚分别洗涤3次（离心机设定8 000 g，2 min，5℃），去上清液.剩余残渣至于50℃烘箱中烘干至恒重，加入1 mL 25%乙酰溴于70℃水浴锅中水浴30 min，待冷却后加入1 mL 2 mol/L的NaOH溶液和0.1 mL7.5mol/L的盐酸羟胺溶液，用醋酸定容至10 mL，摇匀后以表2中1号管作为空白，于280 nm下测定OD值，重复3次.测定得到的OD值先代入回归方程中计算得到浓度C，然后再计算得到木质素含量.采用Excel 2007和SPSS 17.0对数据进行差异显著性与相关性分析.