《表1 PCR引物：甲状腺乳头状癌MMP-2、MMP-9的表达与BRAF~(V600E)基因突变的关系》

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《甲状腺乳头状癌MMP-2、MMP-9的表达与BRAF~(V600E)基因突变的关系》

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（1）RNA浓度、纯度测定：PTC组和对照组细胞总mRNA提取后，用Biowave II紫外可见分光光度计进行分析，总mR-NA浓度主要集中在1.700～2.428μg/μL，A260/A280比值主要集中于1.742～1.963。总RNA纯度较高，无污染及降解。（2）利用实时荧光定量RT-PCR检测MMP-2、MMP-9分别在对照组和PTC组、BRAFV600E基因野生型及突变型的mRNA表达水平。所有样本的MMP-2、MMP-9及内参基因均重复3孔检测，以β-actin为内参进行标准化，电脑中读取内参基因及目的基因的Ct值，结果采用2-△△Ct值法定量计算MMP-2、MMP-9相对表达量。引物序列见表1。