《表3 RNA转录本对多通道、单通道检测方法最低检出限（LOD）比较》

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《北美洲流行汉坦病毒多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立》

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注：BAYV.牛轭湖病毒；ELMCV.厄尼诺洛峡谷病毒；ISLAV.岛景病毒；NYV.纽约病毒

结果显示，本研究建立的多重检测方法最低可检测到1拷贝/μL的BAYV、ELMCV体外转录RNA，以及10拷贝/μL NYV、ISLAV的体外转录RNA，与单通道检测结果一致。在1×101拷贝/μL～1×107拷贝/μL浓度范围内，标准曲线均具有良好线性，相关系数均在0.997以上，检测方法的扩增效率在93.1%～102.6%，且所有阴性对照及空白对照孔均无阳性扩增。表2列出了各浓度体外转录RNA多通道与单通道检测Ct均值。考虑到标准曲线的线性范围，我们以Ct≤35，三个复孔均有Ct值并且具有良好扩增曲线为阳性判断标准，并计算四种病毒单通道和多通道最低检出限（Limit of detection，LOD），结果显示，同一种病毒单重和多重体系下LOD无明显差别（表3）。