《表1 A、B、D、E、J亚群禽白血病病毒和MDV、CAV特异性检测引物》

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《1例禽马立克氏病与传染性贫血病混合感染的诊断与防治》

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将6只患病鸡的肝、脾和胸腺及其他组织材料剪成小块，放入研钵中。倒入适量的液氮，充分研磨，然后按照一定的体积比加入到含有双抗的磷酸盐缓冲液（PBS）中，分装后放到-80℃的冰箱，反复冻融3次，4℃预冷，并以10 000 r/min离心组织匀浆10 min。采用SDS-蛋白酶K抽提法，按照说明书的要求，从匀浆液的上清液中提取病毒DNA样本，用特异性引物（表1）进行PCR扩增，检测结果显示CAV和MDV均为阳性。同时，用Trizol试剂RNA提取试剂盒提取病毒RNA，RT-PCR检测结果表明禽白血病A、B、J亚群和禽网状内皮组织增生症病毒均为阴性。结果表明该蛋鸡养殖场的鸡发病主要是禽马立克氏病病毒与传染性贫血病病毒混合感染引起。