《表5 标记根瘤菌对甘农5号紫花苜蓿幼苗根瘤的影响Table 5 Effects of marked rhizobia on root nodule growth of No.5Gannong alf

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《苜蓿根瘤菌绿色荧光蛋白标记株的构建及对菌株结瘤固氮能力的影响》

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根瘤菌主要是侵染寄主植株形成有效根瘤，未接种对照根瘤的鲜重和数量等均较低，此次试验中筛选出5株荧光表达强度较高、回接植株根瘤数、固氮酶活性和单个根瘤鲜重较显著的荧光标记株（图1），其中，在甘农5号紫花苜蓿回接中CK1-gfp2，CK2-gfp2和CK3-gfp4的根瘤数高出对照20%~32%，固氮酶活性为对照的22.9~31.9倍，单个根瘤鲜重高出对照23%~30%，除CK1-gfp2处理占瘤率高于CK3-gfp4处理13.7%外，其他根瘤指标与CK3-gfp4处理差异不显著（P>0.05），CK1-gfp2可作为甘农5号的标记菌株优良菌株研究（表5）。在紫花苜蓿343回接中CK1-gfp2，CK2-gfp4及CK3-gfp4的根瘤数高出对照10%~78%，固氮酶活性为对照的28.9~39.3倍，单个根瘤鲜重高出对照35%~60%，除CK1-gfp2处理占瘤率高于CK3-gfp4处理7.04%外，其他根瘤指标与CK2-gfp4处理差异不显著（P>0.05）。依据植物促生能力、占瘤率和结瘤情况数据分析，表明CK1-gfp2及CK2-gfp4可分别作为紫花苜蓿343的优良标记菌株用于更深研究（表6）。结果表明，三亲本杂交后代的相同供体菌株中固氮能力和结瘤等之间的差异不显著，说明三亲本杂交方法质粒通过辅助菌株接合受体菌株的整个过程，对不同接种根瘤菌菌株的固氮能力和结瘤能力未产生明显的影响，能作为研究苜蓿根瘤菌的有效示踪荧光。