《表1 实验条件:重组蛋白中G418残留量超高效液相色谱-蒸发光散射检测方法的建立》

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《重组蛋白中G418残留量超高效液相色谱-蒸发光散射检测方法的建立》


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取920μL重组蛋白药物原液和80μL1 mg/mL G418混匀,即为0.08 mg/mL G418质控品(质控品是向样品中加入一定量G418标准品溶液,以监控样品中添加G418的回收率)。分别取样品和质控品400μL,经10 kDa超滤离心管,8 072×g离心5 min,重复以上步骤,收集透过液,待上样进行分析。取0.01、0.02、0.05、0.10、0.15和0.20 mg/mL G418标准工作液,用于绘制标准曲线。分别取以上6种浓度的G418标准工作液各100μL,以及QC(0.08 mg/mL G418水溶液)、样品、经过离心处理的质控品各100μL,加至液相微量管中,于Eppendorf管中16 200×g快速离心1 min,去除气泡,将微量管转移至样品瓶中待测。以水和重组蛋白药物制剂缓冲液为空白对照。按表1实验条件及表2进样序列进行分析。