《表1 引物序列信息:长顺绿壳蛋鸡OC–116基因变异对蛋壳品质的影响》

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《长顺绿壳蛋鸡OC–116基因变异对蛋壳品质的影响》


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根据NCBI上收录的鸡OC–116基因序列(Gen Bank登录号为NC_006091.5)设计2对多态引物(表1)。引物OC–F/R扩增区域从第1外显子到第2内含子,引物OC–F1/R1扩增区域从第2内含子到第5外显子。引物由重庆擎科生物技术有限公司合成。PCR扩增反应体系:1.1×T3 Super PCR Mix 17μL,基因组DNA模板1μL,上游引物和下游引物各1μL,总体积为20μL。反应程序:98℃预变性2 min;98℃变性10 s,60℃退火10 s,72℃延伸10 s,共35个循环;72℃终延伸2 min。于135 V电压下,用1.3%的琼脂糖凝胶电泳25 min,选取特异性较好的PCR扩增产物,由上海生工生物工程股份有限公司进行单个测序。