《植物病毒分类和鉴定的原理及方法》求取 ⇩

第一部分植物病毒学概论1

1.1植物病毒的发现和定义1

1.1.1病毒的发现过程1

1.1.2病毒的定义3

1.2病毒学发展过程中的五个阶段5

1.2.1感性认识和症状描述阶段5

1.2.2机体水平研究阶段6

1.2.3病毒的病理学及病害流行学研究阶段6

1.2.4病毒的生物化学和生物物理学研究阶段6

1.2.5分子病毒学阶段7

1.3植物病毒的形态和结构10

1.3.1病毒的形态11

1.3.2植物病毒的结构12

1.3.3植物病毒正链RNA的基因结构和表达调控15

1.3.3.1植物正链RNA病毒的基因结构15

1.3.3.2植物正链RNA病毒的基因表达和调控19

1.4植物病毒所造成的经济危害22

1.5病毒在农业生产中的应用24

1.5.1DI颗粒是病毒抑制病毒的“活”工具25

1.5.2病毒用于控制农业生产上的致病寄生菌25

1.5.3病毒用于清除或防治农业上几大灾害26

1.5.4病毒弱毒株系在农业上的应用28

第二部分植物病毒的分类和命名31

2.1病毒的起源31

2.2生物分类系统32

2.2.1大的生物分类系统的发展和变化32

2.2.2植物病毒在生物分类系统中的地位34

2.3植物病毒的分类36

2.4植物病毒分类的历史37

2.4.1Johnson等分类法37

2.4.2Holmes的植物病毒分类法41

2.4.3其它一些分类系统和特点42

2.5植物病毒命名43

2.6病毒分类和命名中的编码46

2.7目前所采用的最新分类系统48

2.7.1分类和命名的有关国际组织和工作程序48

2.7.2目前采用的分类系统和现状48

2.7.3最近的研究动态51

2.8植物病毒分类系统中各科、组的分类内容52

2.9未来的分类趋势80

第三部分植物病毒鉴定、分类的方法和技术1

3.1鉴定和分类指南1

3.2分类鉴定指标1

3.3植物病毒的传播4

3.3.1介体传播5

3.3.2昆虫介体传播方式的测定6

3.3.3线虫传播87

3.3.4真菌传毒88

3.3.5种子和花粉传播病毒90

3.3.6种子和花粉的传播种类及测定方法90

3.3.7病毒的汁液机械传播92

3.4植物病毒的外部症状95

3.5植物病毒汁液（或粗提纯）体外物化特性及测定96

3.6植物病毒的分离和提纯97

3.6.1植物病毒提纯的一般程序98

3.6.1.1病毒的繁殖98

3.6.1.2病毒的抽提98

3.6.1.3澄清99

3.6.1.4浓缩99

3.6.1.5纯化植物病毒100

3. 6. 2影响病毒提纯的因素101

3. 6. 2. 1病毒粒子的凝集101

3. 6. 2. 2病毒粒子的钝化101

3.6. 2. 3病毒外壳蛋白的水解101

3. 6. 3植物病毒的粗提纯101

3. 6.4植物病毒的精提纯103

3.6.5一些植物病毒的提纯实验程序103

3. 7植物病毒的电子显微镜诊断方法109

3.7. 1植物病毒形态的电镜观察和诊断技术109

3.7.2超薄切片的制备和电镜观察111

3.7. 3铜网的清洗和支持膜的制作115

3.8植物病毒的内含体及观察技术116

3.8. 1内含体的形态和种类116

3.8.2内含体观察方法120

3. 9血清学诊断的原理和技术121

3. 9. 1血清学试验的原理121

3. 9.2抗血清的制备123

3. 9. 3血清学反应试验125

3. 9. 3. 1玻片凝集反应125

3.9.3.2琼脂免疫双扩散试验126

3. 9. 3. 3免疫电泳127

3. 9. 3. 4酶联免疫吸附测定法（ELISA）128

3. 9.4单克隆抗体的制备和应用132

3. 10核酸分子杂交技术在植物病毒鉴定和分类中的应用135

3. 10. 1互补DNA探针的制备136

3. 10. 1. 1随机引物和反转录酶法制备cDNA探针136

3. 10. 1.2缺口翻译制备cDNA探针136

3. 10.2分子杂交试验137

3. 10.2. 1斑点杂交试验137

3. 10. 2. 2核酸吸印转移杂交技术138

3. 10. 2. 3原位杂交139

3. 11PCR技术在植物病毒鉴定和分类中的应用141

3. 11. 1PCR原理142

3. 11. 2PCR反应所需要的材料143

3. 11. 3PCR扩增方法144

3. 11. 3. 1PCR扩增DNA144

3. 11. 3. 2PCR扩增RNA146

3. 11. 3. 3PCR进行DNA测序148

3.12植物病毒的保存和贮藏150

3.12.1直接冷冻150

3.12.2冷冻干燥151

3.12.3化学干燥法151

第四部分病毒的植物检疫153

4.1检疫的起源153

4.2早期的植物检疫立法情况154

4.3国际植物保护公约154

4.4植物检疫的原理155

4.5植物病害检疫对象的确定原则156

4.6植物病毒在检疫中的重要性156

4.7植物病毒在检疫中的特殊性及病毒检疫的方法和技术157

4.7. 1检疫中的特殊性157

4.7.2检疫方法和技术158

4.7.2. 1生物学方法158

4.7.2.2物理学测定方法159

4.7.2.3生物化学方法159

4.7.2.4分子生物学技术159

4.8种质资源中的病毒检疫160

4.9中国对外植物病毒检疫名录162

第五部分一些与植物病毒相类似的病原169

5. 1植物类菌原体（MLO）169

5.1.1植物类菌原体的特性169

5. 1. 2分类171

5.1.3病理学特性171

5.1. 4MLO的诊断和鉴定172

5.1.5分子生物学173

5. 1. 6类菌原体的提取174

5. 2螺原体175

5. 2. 1螺原体的形态和超微结构176

5. 3类立克次氏体（RLO）177

5. 3.1类立克次氏体的形态和超微结构178

5. 4类病毒178

5. 4. 1类病毒及类病毒病种类179

5.4.2类病毒的鉴定181

5. 5植物卫星病毒和卫星RNA183

5. 5.1植物病毒卫星的鉴定184

5.6植物病毒卫星和辅助病毒及宿主植物之间的相互关系185

主要参考文献187

附录一已正式发表的植物病毒英、中文名录190

附录二病毒学实验中常用缓冲液及试剂的配制202

附录三常用度量衡表206