《表1 q PCR引物信息》

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《转录组学分析意大利蜜蜂脑部哺育行为相关基因》


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在DEG中随机选取4个基因。利用Primer Premier 6设计特异性引物(表1),其中以Actin(NM_001185146.1)作为内参基因,委托上海生工生物工程有限公司进行引物合成。反应体系:SYBR Premix Ex TaqⅡ(Ta Ka Ra公司,日本)5μL,引物(2μmol·L-1)2μL,模板(500 ng·μL-1)2μL,dd H2O补充至10μL。PCR程序分为3步:第一步为95℃预变性30 s;第二步为95℃变性5 s,60℃退火30 s,共40个循环;最后一步为熔解曲线分析:65℃开始,每5 s上升0.5℃,直至上升到95℃。整个反应程序在荧光定量PCR仪(Bio-Rad公司,美国)上进行,按照说明书进行操作。以2-ΔΔCt法[18]计算哺育蜂脑部DEG的相对表达量。