《表2 不同引物特异性检测》

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《解淀粉芽孢杆菌实时荧光定量PCR测定方法的建立及其在豆粕发酵中的应用》

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自备菌种为经本实验室分离、16S rRNA测序、鉴定后的菌种；（1）为gyrA1-F/gyrA1-R引物对，产物大小为115 bp；（2）为gyrA2-F/gyrA2-R引物对，产物大小为96 bp；（3）为16S rRNA-F/16S rRNA-R引物对，产物大小为164 bp。“+”表示常规PCR反应阳性，“-”表示常规PCR反应阴性。

以gyrA及16S rRNA基因为靶标设计出的3对引物进行常规PCR扩增，由表2可知，只有引物对gyrA1-F/gyrA1-R扩增解淀粉芽孢杆菌KCA，采用gyrA2-F/gyrA2-R可同时扩增解淀粉芽孢杆菌KCA及地衣芽孢杆菌KCB；采用引物对16S rRNA-F/16S rRNA-R可将芽孢杆菌属内的菌株扩增出条带（164 bp）。这表明引物对gyrA1-F/gyrA1-R能特异性扩增解淀粉芽孢杆菌，因此选用gyrA1-F/gyrA1-R作为本研究建立实时荧光定量PCR方法的特异性引物对。