《表2 等位基因特异性引物引入适当突变碱基可增加突变检测特异性》

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《一种检测kras基因突变的新型TB-ARMS qPCR方法的建立》

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对kras突变的引物优化结果（表2）表明，kras-G34A等位基因特异性引物3′端倒数第5位引入突变碱基C>A的等位基因特异性引物G34A-R3较未引入突变碱基的等位基因特异性引物G34A-R1、G34A-R2对0.1%和0.01%样品突变检测的△Ct值明显增大；同样，3′端倒数第5位引入突变碱基C>A的等位基因特异性引物G34T-R4较3′端未引入突变碱基的等位基因特异性引物的G34T-R1、G34T-R2的△Ct值增大，较Tm值较高的G34T-R3突变检测的△Ct值亦增大；而对于kras-G38A倒数第6位引入突变碱基C>A的等位基因特异性引物G38A-R4较3′端未引入突变碱基的等位基因特异性引物G38A-R1、G38A-R2的△Ct值增大，较3′端倒数第5位引入突变碱基T>C的等位基因特异性引物G38A-R5、G38A-R6的△Ct值也增大，较Tm值较高的G38A-R3突变检测的△Ct值亦增大，G38A-R4检测特异性最好。