《表1 本研究中所用PCR引物信息》
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《LncRNA在柑橘木虱与黄龙病病原菌互作中的差异表达分析及验证》
为验证生物信息预测的带菌与无菌成虫中lncRNA的差异表达,选取赣州品系带菌与无菌成虫采用相应引物(表1)进行实时荧光定量PCR(realtime fluorescene quantitative PCR,qPCR)扩增,以验证lncRNA的表达。20μL qPCR反应体系:2×ChamQTM SYBR?qPCR Green Master Mix 10μL、10μmol/L上下游引物各0.4μL、ROX II 0.4μL、cDNA模板2μL、灭菌双蒸水6.8μL。采用两步法反应程序:95℃预变性3 min;95℃变性5 s,60℃退火并延伸31 s,共40个循环。结束后进行熔解曲线分析,采用比较Ct值的相对定量法(2-ΔΔCt法),ΔCt=Ct-目的基因-Ct-内参基因;ΔΔCt=(Ct-目的基因-Ct-内参基因)试验组-(Ct-目的基因-Ct-内参基因)对照组(Livak&Sch-mittgen,2001)。所有试验均设3次生物学重复。
图表编号 | XD00128910100 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.12.01 |
作者 | 陈梦瑶、曹征鸿、贺康、梅洋、魏圣飞、肖花美 |
绘制单位 | 宜春学院生命科学与资源环境学院江西省作物生长发育调控重点实验室、浙江大学昆虫科学研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室、浙江大学昆虫科学研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室、浙江大学昆虫科学研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室、浙江大学昆虫科学研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室、浙江大学昆虫科学研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室、宜春学院生命科学与资源环境学院江西省作物生长发育调控重点实验室、浙江大学昆虫科学研究所农业农村部作物病虫分子生物学重点实验室 |
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