《表1 供试26份秦巴山地玉米自交系名称及材料编号》

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《秦巴山地玉米种质资源的SSR标记遗传多样性分析》

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供试26份秦巴山地玉米自交系由汉中市农科所玉米研究室提供。试验于2016年4—11月在汉中市农科所分子育种实验室进行，材料于2016年4月在农科所韩塘试验基地按照高密度筛选（9 000株/667m2）的方法种植，其名称及编号见表1。田间管理同选种圃管理。在玉米自交系苗期5叶期取幼嫩叶片，采用CTAB法提取DNA，选用平均分布于玉米的10条染色体上的40对SSR引物，序列参照农业行业标准《玉米品种鉴定技术规程SSR标记法》（NY/T 1432—2014），该方法用于中国玉米品种一致性鉴定及中国玉米自交系与杂种指纹图谱的构建，是适用于我国玉米种质资源研究的一套核心引物[9-12]。引物由北京奥科鼎盛公司合成。PCR反应体系为15μL，PCR反应程序为95℃预变性5 min，94℃变性30 s，55～60℃（根据引物Tm值不同而定）退火60 s，72℃延伸60 s，共35个循环，最后72℃再延伸10 min，4℃保存待测。反应产物用6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，银染照相。