《表3 PSR反应不同组别钙黄绿素指示结果》

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《基于聚合酶螺旋反应技术快速检测铜绿假单胞菌》

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注:+:阳性组；-:阴性组.

按PSR反应的可视化方法（表2），使用不同浓度组合的钙黄绿素指示剂（组别1-8）进行PSR反应，观察其产物在可见光下（图3A）和紫外光激发下的荧光情况（图3B）。钙黄绿素指示剂低浓度组（组别2、3、4）和高浓度组（组别8）的阳性组溶液呈现绿色，阴性组保持橙色不变，肉眼即可分辨（图3A），且在紫外灯下可见绿色荧光（图3B）。为确保检测结果的准确性，进行3次重复实验，数据统计如表3所示。结果表明氯化锰终浓度低于0.5 mmol/L（组别4、3、2、8）时，建立的PSR反应正常进行。但氯化锰终浓度高于0.4 mmol/L（组别1、7、6、5）时，过量的锰离子可能对PSR反应有抑制作用。同时组别8阴、阳性颜色对比与组别2、3、4相比，视觉差异更加明显，而且显色时间更短。因此，组别8（钙黄绿素50μmol/L、氯化锰0.4 mmol/L）可作为钙黄绿素指示剂的使用浓度。