《表1 动物分组及免疫剂量》

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《载副猪嗜血杆菌PLGA Omp16蛋白微球的制备及其免疫效果的初步研究》

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将40只健康KM小鼠随机分成4组，分别免疫PLGA微球疫苗、PLGA空载微球（即制备过程中不添加抗原蛋白）、H.parasuis灭活疫苗[8]和生理盐水。小鼠通过皮下注射接种，14 d后加强免疫1次，免疫剂量和免疫途径同首次免疫（表1）。分别在接种前、首次免疫后二周（14 d.p.i）和再次免疫后二周（28 d.p.i）采集小鼠眼眶后静脉丛血液，分离血清，采用ELISA法测定血清抗H.parasuis Ig G抗体滴度[9]。将血清作1:80稀释后，按100μL/孔加入H.parasuis抗体ELISA检测反应板（预包被H.parasuis Omp16蛋白抗原1μg/m L），置37℃孵育40 min。洗板3次后，加入1:10 000稀释的HRP标记羊抗鼠Ig G，100μL/孔，置37℃孵育30 min。洗板3次，加入底物TMB，100μL/孔，37℃避光显色10 min。加终止液2 mol/L H2SO4，50μL/孔，混匀。终止反应后10 min内在酶标仪上测定OD450nm值。