《表1 流动相为0.1%磷酸和乙腈的测试数据》

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《纺织品中分散黄23和分散橙149高效液相色谱分析测定方法的探究》

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流动相A:0.1%磷酸；流动相B:乙腈

为了使目标产物得以分离，在高效液相色谱方法开发中，流动相的选择是极其重要。一般来说，常用作反相色谱的有机相是甲醇和乙腈。两者相比，甲醇活性比乙腈高有时候会与某些样品反应、在低波长下有紫外吸收，因此会降低方法的灵敏度，但是价格相对来说较为便宜，而乙腈价格较高但洗脱能力较好且很少和样品发生反应，同时截至波长比甲醇低20nm。在本方法中，为了提高分析方法的灵敏度，我们选择使用乙腈作为有机相。在水相的选择中，为了改善峰型，提高响应值和分离度，一般会调节水相体系的p H值，加入酸或者缓冲盐。在标准GB/T 23345-2009纺织品分散黄23和分散橙149的测定中就使用了0.1%的磷酸溶液作为水相。为了探究不同流动相对分析方法的影响，本实验通过采用0.1%磷酸溶液、0.1%甲酸溶液和0.1%醋酸铵溶液-醋酸溶液（p H=4.5）作为流动相探究不同水相流动相对目标产物分离度和响应值的影响。为了保证实验过程的准确性，实验分别采用了0.5mg/L、2.5 mg/L、5 mg/L的混标溶液在不同的流动相条件下进行梯度洗脱，实验结果如表1、2、3所示。