《表5 r HSV-1按不同MOI感染细胞培养不同时间的感染滴度》

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《重组人1型单纯疱疹病毒样品的活性检测研究》

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取25 cm2细胞瓶中生长状态良好的U-2 OS和MRC-5，去除培养基后，以1 mL PBS清洗，用1 mL0.25%胰酶消化，细胞变圆后，用1 mL基础培养基终止消化，轻轻吹打制备细胞悬液，以2 000 r·min-1离心10 min，去上清，用5 mL基础培养基重悬细胞，以每孔0.5 mL接种于6孔细胞板，每种细胞各接种13孔，于37℃、5%CO2细胞培养箱培养过夜。每种细胞各取1孔弃细胞培养上清，以0.5 mL PBS清洗后，用0.5 mL 0.25%胰酶消化，待细胞变圆后，用0.5 mL基础培养基终止消化，轻轻吹打制备成细胞悬液，计算各自细胞密度。rHSV-1按MOI为0.5、1和2分别感染2种细胞其余各孔，于37℃吸附2 h后，用增殖培养基洗涤细胞面，作为病毒增殖的起始对照样本，分别于增殖培养第0、8、24和48 h收获病毒，同时观察细胞病变。收获物反复冻融3次检测感染滴度，确定病毒的感染复数和培养时间。检测结果见表5、6。