《表1.PCR引物序列：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA252辅酶A二硫化物还原酶缺失延缓苯唑西林的次级损伤效应》

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《耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA252辅酶A二硫化物还原酶缺失延缓苯唑西林的次级损伤效应》

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将pKOR1cdr、pOS1cdr质粒电击转入金黄色葡萄球菌RN4220中，再将验证正确的RN4220转化子（PKOR-F/PKOR-R或POS1-F/POS1-R），直接噬菌体Φ85转化[15]至目标菌株MRSA252、MRSA252-Δcdr，涂布于含氯霉素TSA平板筛选，再进行PCR验证（PKOR-F/PKOR-R或POS1-F/POS1-R），获得MRSA252（p KOR1cdr）菌株及回补株MRSA252-Δcdr（p OS1cdr）。将MRSA252（p KOR1cdr）菌株在含氯霉素的TSB中43°C孵育传代3次，再将10–4稀释的过夜孵育菌液涂布于含1 mg/mL的脱水四环素TSA平板30°C孵育2 d，将单菌落分别接种于含氯霉素和无抗生素TSA平板上，37°C孵育过夜，再将只在无抗板上长出的单菌落进行菌落PCR鉴定，获得成功敲除的菌株MRSA252-Δcdr。