《擎天树发芽种子的组培繁殖方法》

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课题来源与背景:擎天树(Parashorea chinensis Wang Hsie.),龙脑香科柳桉属,常绿高大乔木,为亚洲热带雨林中最繁茂、最具代表性的树种。树干可高达50米至60米,雄居林冠之上,木材坚硬、耐腐性强,木材纹理直,结构均匀,加工容易,刨切面光滑,花纹美观,为制造各种家具的高级用材,具有重要经济价值和科学研究价值,是国之瑰宝。擎天树分布狭窄,只分布在西双版纳的补蚌和广纳里新寨至景飘一带的20平方公里范围内;生长环境大部分为原始沟谷雨林及山地雨林,多成片生长,组成独立的群落,形成奇特的自然景观,是中国一级保护植物之一。擎天树开花结实较晚,一般在胸径达1000px以上才开花结实,结实稀少,且每隔2-5a才开花结实1次,落果严重,不易采种。擎天树的种子发芽很快,在林地上l-4d便发芽,在高温多雨环境,有些成熟果尚在母树上,种子就已发芽,严重影响着苗木培育的成功率。擎天树若采用嫩枝或硬枝扦插技术,季节性强,每年的3月至7月是扦插适宜季节,扦插成活率70%。由于擎天树枝条内含酚类物质,嫩枝扦插褐化严重,硬枝扦插不定根发生时间长,如遇上干旱或高温梅雨恶劣气候,擎天树枝条容易干枯或腐烂致死。因擎天树生物特性特异,严重限制着该资源的开发利用。采用组培繁殖技术是促进擎天树人工林发展的有效途径。由于擎天树幼嫩茎段密布绒毛,灭菌难度大。为了获取擎天树组培快繁繁殖体,探索擎天树发芽种胚灭菌消毒的方法尤为重要。技术原理及性能指标:该发明的技术原理是:擎天树组织培养要求外植体无菌。外植体生长于大自然,表面吸附着无数的真菌和细菌。真菌和细菌主要由蛋白质组成。成果使用的氯化汞(HgCl<,2>)是一种剧毒的重金属盐杀菌剂,其杀菌的原理是Hg<'2+>可与带负电荷的蛋白质结合,使细菌和真菌蛋白变性,酶失活。该发明的性能指标:剪去擎天树已发芽种子的种翅,清水冲洗种子表面后,剥除种壳,置于30-35℃无菌水内浸洗2-5min,置于超净工作台上,用质量浓度0.8-0.9‰氯化汞(HgCl<,2>)溶液中浸泡2-5min,用30-35℃无菌水清洗5-8次;发芽种胚无菌率80%-94%,种胚枯死率低于6%,成苗率在90%-92%。技术的创造性与先进性:国内首次使用0.8-0.9‰氯化汞(HgCl<,2>)溶液对擎天树发芽种胚进行灭菌消毒,灭菌消毒2-5min,既有效地杀死发芽种胚的细菌及真菌,又能保持发芽种胚的生命力,获取活的无菌发芽种胚。为擎天树组培快繁育苗技术的研究不仅提供了资源基础,还奠定了科学技术。技术的成熟程度,适用范围和安全性:该技术可以较好地应用于擎天树组培苗生产前期无菌繁殖体的获取和繁殖体系的建立。适用范围:国营、集体和个人擎天树组培苗木的生产。该成果实施过程中,有少量“三废”产生:消毒用乙醇、HgCl<,2>等废液,外源激素、育苗塑料托等废料,废枝条等。在实施过程中注意解决所产生的少量“三废”问题,成果应用没有危险性。采取的措施:制定防止“三废”问题的规章制度;“三废”的处理:对消毒用乙醇、HgCl<,2>等废液必须先倒入指定的容器中,经过中和或者经过氧化-还原或其它化学处理无害后才可排放;外源激素、育苗塑料托等废料,要按照国家环境保护有关规定,进行无害化处理后,再行排放,避免造成环境污染。应用情况及存在的问题:应用情况:该发明直接应用于该单位的擎天树组培技术研究中,外植体灭菌消毒,无菌活外植体的获取。存在问题:结实的擎天树地理位置山高陡峭,路途遥远,偏僻,交通不很方便,采种困难,采种成本高。缺乏擎天树采种及其组培技术研究的资金。

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