《一种利用离体叶脉片接种烟草青枯病的人工发病方法》

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烟草青枯病在全球普遍发生,是烟草生产的毁灭性病害,许多与防病控害有关的基础研究和重大理论问题研究均离不开接种病菌人工发病这基本手段,特别是该病害的病原菌(Ralstonia solanacearum)是国际上研究植物病原细菌致病机制的模式系统之一,其致病性检测也少不了人工接种发病的工作。高效快捷的人工发病方法是许多学者的共同需求。该发明公开了一种利用离体叶脉片接种烟草青枯病的人工发病方法,该方法的步骤如下:用洁净剂将接种用主要器具洗涤干净后备用;按常规方法培育烟苗备用;用一般细菌培养基平板培养烟草青枯病菌,并用无菌水配成浓度适宜的细菌液作接种体;剪取烟草叶片,裁切成保留主叶脉的离体叶脉片备用;将接种器具组件组装成适合接种用的套具;将离体叶脉片平稳摆置于工作面板上;取备好的烟草青枯病菌细菌液注入小方盘内,液面浸没离体叶脉片的基端切口;取玻璃罩将离体叶脉片罩在方盘内,形成适合叶脉片发病的小罩室,在普通室内培养。一般接种后2天开始表现叶脉坏死症状,5~7天后整个叶脉片全部坏死。该发明的优点是:较长的烟草叶脉片有利于拉开处理间的病情差异;而较窄的叶脉片则有利于在有限的器具空间内接种更多的寄主材料;耗时短,占地少,操作简便效率高;接种发病局部条件容易控制;容易实现接种方法的标准化。

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