《siRNA干扰VEGF基因对恶性黑色素瘤A375细胞的放射增敏作用研究》

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研究针对人VEGF基因mRNA序列构建siRNA重组质粒,转染恶性黑色素瘤A375细胞,设VEGF特异性siRNA转染的实验组、无关序列siRNA转染的阴性对照组和空白对照组,各组均予6MV-X线照射,剂量为0、2、4、6、8Gy,用RT-PCR检测照射前后各组A375细胞中VEGFmRNA表达情况。采用siRNA干扰技术基因沉默恶性黑色素瘤细胞的VEGF基因,并与放射治疗相联合,观察VEGF-siRNA的放射增敏作用。研究内容:实验通过构建VEGF-siRNA重组质粒,转染入恶性黑色素瘤细胞,设VEGFsiRNA转染组、无关序列siRNA阴性对照组、空白对照组,分组照射,应用免疫组化法、RT-PCR等方法检测转染后的VEGF表达情况,用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化情况,通过MTT法绘制细胞生存曲线,观察细胞放射敏感性变化。不同剂量X射线照射后,siRNA实验组细胞存活曲线较对照组明显下降,差异有统计学意义(p<0.01);阴性质粒对照组与空白对照组吸光度A值比较,差异无统计学意义(p>0.05)。放射合并VEGF-siRNA可提高A375细胞的放射敏感性,为临床以VEGF为靶向基因联合放疗治疗恶性黑色素瘤提供理论依据。为临床开展针对恶性黑色素瘤VEGF基因的靶向治疗和放射治疗的联合治疗提供了理论依据。

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