《表1 实时定量引物序列:SIRT1/FoxO1通路对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成的影响》
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《SIRT1/FoxO1通路对奶山羊乳腺上皮细胞脂质合成的影响》
乳脂合成基因及内参基因实时定量引物见表1,根据GenBank已公布的山羊基因序列,利用Primer Premier 5.0和Oligo 6软件分别设计特异实时荧光定量引物,采用跨内含子的方法,每对定量引物的上、下游引物分布在不同的外显子上,扩增产物长度约200 bp,各引物序列由上海生工生物工程有限公司合成。以GAPDH和UXT基因作为内参进行实时荧光定量PCR反应。PCR反应体系20μL:2×SYBR Premix Ex Taq Mix 10.0μL,cDNA模板1.0μL,上、下游引物(10μmol/L)各0.8μL,加RNase free H2O补足体系。于ABI 7500荧光定量PCR仪上进行反应,反应条件:95℃30 s,95℃5 s,60℃30 s,40个循环;添加熔解曲线。采用2-△△Ct法对数据进行分析,其中△Ct=Ct目的基因-Ct内参;△△Ct=△Ct试验组-△Ct对照组。每个样品设置3个重复。
图表编号 | XD0098544000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.10.10 |
作者 | 李君、梁文双、赫秋亚、杨芳慧、权凯、王笑笑、邓红雨 |
绘制单位 | 河南牧业经济学院动物科技学院河南省反刍动物营养与饲料资源开发国际联合实验室、河南牧业经济学院动物科技学院河南省反刍动物营养与饲料资源开发国际联合实验室、西北农林科技大学动物科技学院、河南牧业经济学院动物科技学院河南省反刍动物营养与饲料资源开发国际联合实验室、河南牧业经济学院动物科技学院河南省反刍动物营养与饲料资源开发国际联合实验室、河南牧业经济学院动物科技学院河南省反刍动物营养与饲料资源开发国际联合实验室、河南牧业经济学院动物科技学院河南省反刍动物营养与饲料资源开发国际联合实验室 |
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