《表1 引物序列:层粘连蛋白对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白表达的调控》

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《层粘连蛋白对奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白表达的调控》


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使用组织细胞RNA微量提取试剂盒(Magen),从乳腺组织中提取总RNA,NanoDrop 2000检测RNA浓度,OD260 nm/OD280 nm确定RNA纯度。按照逆转录试剂盒说明,将总RNA反转录成cDNA。q RT-PCR上机采用20 uL体系,反应程序:95℃,30 s预变性。95℃,5 s;60℃,30 s;进行40个的循环。cDNA模板按5-100倍稀释(<100 ng),上下游引物均按0.4μmol/L添加,如表1。