《表2 类胡萝卜素主要代谢基因qRT-PCR验证分析》

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《烟叶衰老过程中类胡萝卜素代谢及相关基因表达分析》

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注：小写字母不同表示差异显著（p<0.05）。

qRT-PCR分析表明（表2），类胡萝卜素代谢上游合成基因CRTISO在叶片衰老过程中下调表达，65 d时表达量下调至0.74倍，ZDS基因在45 d时上调表达，45 d后该基因表达量明显下降。下游合成基因LYCE、LYCB下调表达，75 d时表达量分别下降至15 d的0.50倍和0.21倍；类胡萝卜素转化基因ZEP、NXS、NCED呈现上调表达，在65 d时表达量分别上调9.20、3.25和3.21倍，而CCS在整个衰老时期下调表达，在75 d时下调至15 d的0.32倍。其中，类胡萝卜素转化为ABA的关键基因NCED明显上调，表明衰老叶片中类胡萝卜素正在积极地转化为ABA，从而促使叶片衰老过程的持续进行。另外，类胡萝卜素降解基因PAL表达量在45 d后明显下降，而POD与LOX基因上调显著，75 d时分别上调3.9倍和18.09倍。调节类胡萝卜素合成的转录因子HY5、COP1、DET1在烟叶衰老过程中表达量呈现下调趋势。其中COP1和DET1下调最明显，75 d时表达量分别下降到15 d的0.45倍和0.38倍。而Cry-2表达量在衰老叶片中上调表达，65 d时表达量上调至15 d的7.55倍。定量分析结果与转录组分析结果基本一致，这说明转录组测序结果能够反映类胡萝卜素代谢相关基因在衰老过程中的表达情况。