《表1 豌豆酯酶纯化效果》

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《豌豆酯酶的纯化和酯酶活性表征及其对农药的敏感性》

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本研究主要通过Hi-Trap SP HP柱的阳离子交换层析和Superdex 200柱的凝胶过滤层析对豌豆酯酶进行纯化，表现出较好的纯化效果。表1中给出了每个纯化阶段的回收率、纯化倍数和比酶活性。从中可知豌豆酯酶的最终纯化倍数达41倍，回收率为21.6%，比酶活性为0.695 U/mg。从阳离子交换层析的洗脱图（图1-A）可知，有2个蛋白峰被洗脱，峰I具有较高的酯酶活性（图1-C）。收集峰I流分进行凝胶过滤层析，有5个蛋白质峰被洗脱（图1-B），其中峰Ⅶ具有最高的酯酶活性（图1-C）。通过SDS-PAGE确认纯化所得的豌豆酯酶的分子质量和纯度（图1-D）可知，纯化的豌豆酯酶为单一条带。已有的研究发现，大多数植物酯酶具有低分子质量，并含有单一的多肽链，分子质量范围为20～60 kDa[23-25]。从SDS-PAGE中发现，豌豆酯酶的分子量约为26.0kDa。