《表3 免疫相关基因及内参引物》

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《发酵豆粕替代鱼粉对卵形鲳鲹生长和血清生化的影响》

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利用Beacon Designer 7设计IGF-1和GH特异性引物，以卵形鲳鲹ef-1α（elongation factor 1 alpha）作为内参，引物序列见表3。肝脏组织cDNA模板浓度稀释至（50±5）ng·μL–1作为荧光定量模板，q PCR反应根据SYBR Pre-mix Ex Taq TM试剂盒（Ta Ka Ra）说明书进行。qPCR反应体系为12.5μL，1μL cDNA模板，0.5μL正向引物，0.5μL反向引物，4.25μL ddH2O和6.25μL SYBR Pre-mix Ex Taq。qPCR反应条件为：94℃预变性30 s；94℃变性5 s，62℃退火30 s，72℃延伸30 s，循环40次。每个样品和内参设4个重复。实验数据使用△CT法（2–△△CT）进行分析。