《表2 实时荧光定量PCR体系》

《表2 实时荧光定量PCR体系》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《玉米ZmTOC1a、ZmTOC1b基因的克隆、表达及亚细胞定位分析》


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分别取玉米的胚芽鞘、胚根、花药、雄穗、穗轴、花丝、苞叶、穗位叶、茎、气生根及根系,使用液氮速冻,并磨碎为粉末状。后使用RNA提取试剂盒将这11个部位叶片提取RNA,并反转录为cDNA(参考1.2.1),稀释5倍至工作浓度备用。根据基因序列设计引物,在11份不同组织的cDNA中扩增待测基因和内参基因,本次组织定量试验内参选择为18S。PCR程序为95℃30 s;95℃3 s,58℃5 s,40个循环,每个样本3个重复。实时荧光定量PCR体系参照表2。进行相对定量qRT-PCR分析,使用2-ΔΔCt法(Ct表示循环数)对结果进行计算并使用Excel软件对最终结果进行统计学分析并绘制最终的表达量图表。