《表2 胚胎样本基因分型引物》

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《小鼠胚胎发育过程中Brachyury对Wnt信号通路的作用研究》

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依据美国国立生物技术信息中心（NCBI）中Gen Bank公布的Brachyury（T）基因，使用Primer 6.0软件设计引物并通过NCBI/Primer-BLAST tool进行引物特异性验证，交由Invitrogen中国公司（上海）合成引物（表2）。样本DNA采用50μL PCR反应体系，经94℃5 min预变性，随后35次循环（94℃30 s，57℃30 s及72℃40 s），72℃5 min，完成后中止于4℃。PCR反应液用1%琼脂糖凝胶电泳，定位目的条带并切胶，按照GeneJET Gel Extraction Kit说明书回收目的基因，交由Invitrogen中国公司（上海）测序。