《表1 忽地笑α-葡萄糖苷酶编码基因克隆及表达分析所采用的引物序列》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《忽地笑α-葡萄糖苷酶编码基因的分子克隆与原核表达》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

注:带下划线的序列为与线性化质粒的同源臂，用于基因组装

基于忽地笑的转录组数据库（Wang et al.，2013），选择功能注释为α-葡萄糖苷酶的基因片段，设计该片段的克隆引物以及5'-端和3'-端的RACE（rapidamplification of cDNA ends）引物（表1）。RACE扩增程序为:95℃预变性5 min；95℃变性45 s、56℃退火45 s、72℃延伸2 min，共30个循环；72℃充分延伸10 min；10℃保温。产物经电泳检测并回收后利用连接酶连接pMD19-T克隆载体，并转化大肠杆菌TOP10感受态细胞；过夜培养后，挑取单克隆进行菌落PCR验证，送阳性克隆子至生工生物工程（上海）股份有限公司测序。