《表1 引物序列：凤丹牡丹PoFAD7基因的克隆及表达分析》

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《凤丹牡丹PoFAD7基因的克隆及表达分析》

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以凤丹牡丹种子不同发育期转录组测序数据（SRA accession number:SRP051810）为基础，找到一条含有部分PoFAD7基因的EST序列，根据该序列设计特异引物（见表1）进行3'-RACE。按照多糖多酚总RNA提取试剂盒操作步骤提取总RNA，检测总RNA完整性和浓度，并按照RACE试剂盒操作步骤反转录合成c DNA。利用已设计好的引物进行RT-PCR扩增获得Po FAD7基因3'端基因序列片段，与转录组数据中的EST序列进行拼接获得Po FAD7基因完整的开放阅读框。以Po FAD7基因序列为模板，设计含有起始密码子和终止密码子的特异引物，扩增获得Po FAD7基因的开放阅读框全长序列。