《表1 qRT-PCR引物序列设计》

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《冠心病患者血清miR-34a和HIF-1α水平与冠状动脉侧支循环形成的相关性研究》

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按照Trizol试剂盒操作说明书提取血清总RNA，并通过反转录酶试剂盒SuperscriptⅢ将RNA反转录合成cDNA。采用Real Master Mix试剂盒并利用SYBR GreenⅠ染料进行实时荧光定量PCR检测血清miR-34a表达水平，程序设定为95℃预热30s，95℃15s，60℃15s，72℃15s，共40个循环。以U6为内参基因，引物序列见表1，引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，反应结束后收集数据，并对所得数据Ct值进行分析，采用2-ΔΔCt算法计算miR-34a相对表达量。