《表1 GATA4基因最后一个外显子扩增引物及测序引物》

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《GATA4基因3′UTR区基因多态性与先天性动脉导管未闭相关性研究》


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根据NCBI参考序列(NM_001308093.1)设计扩增引物(表1),扩增包括GATA4最后一个外显子及上游112bp的DNA片段。使用ABI 9700(美国)PCR仪进行扩增。PCR扩增体系25μL:dNTP 2μL、10XBuffer 2μL、上下游引物各0.5μL、Takara Laq DNA聚合酶0.3μL、H2O 18.7μL、DNA模板约100ng。PCR反应条件为:95℃5min,95℃30s,62℃30s,72℃120s,共35个循环,72℃延伸20 min。