《表2 Sa UGT1, Sa UGT2 RT-PCR引物》

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《欧洲花楸糖基转移酶基因的全长克隆与表达分析》

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以YE诱导不同时间样品的cDNA为模板，选取actin作为看家基因，检测欧洲花楸悬浮细胞中糖基转移酶SaUGT1和SaUGT2基因表达量的变化，设计实时荧光定量引物，见表2。反应体系:2×SYBR Green Mix 5μL，正反向引各0.5μL，cDNA 1μL，ddH2O补足至10μL。反应程序:50℃2 min；95℃10min；95℃15 s，60℃1 min，40个循环。每个循环后采集荧光信号，60～95℃做溶解曲线分析。反应结束后分析扩增曲线和溶解曲线。每个样品做技术重复3次，并通过2-ΔΔCt法[17]分析SaUGT1和SaUGT2基因的相对表达量。