《表1 PCR引物序列：博尔塔拉蒙古自治州儿童口腔变形链球菌的分布及其与龋病的相关性研究》

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《博尔塔拉蒙古自治州儿童口腔变形链球菌的分布及其与龋病的相关性研究》

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根据细菌基因组DNA提取试剂盒说明书规范提取变形链球菌DNA，并通过核酸定量仪测定DNA纯度和浓度。葡糖基转移酶gtfB基因的特异性引物GtfB（5'-ACTA-CACTTTCGGGTGGCTTGG-3'，5'-CAGTATAAGCGC-CAGTTTCATC-3'）和葡聚糖结合蛋白gbpB基因的特异性引物GbpB（5'-CAACAGAAGCACAACCAT-CA-3'，5'-GTCCACCATTACCCCAGT-3'）用于对变形链球菌的再次鉴定[5]。PCR反应体系（25μL）:DNA模板2μL，PCR Master Mix 12.5μL，上下游引物各0.5μL，双蒸水（dd H2O）9.5μL。反应条件:95℃预变性2 min，26个循环（95℃变性30 s，55℃退火1 min，72℃延伸l min）后，72℃延伸5 min。将扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳（1倍TBE缓冲液，110 V电泳40 min），UA159用作阳性对照，蒸馏水作阴性对照，DNA相对分子质量标准为DL 2000，凝胶成像系统记录带型。使用两种引物分别在517 bp和104 bp处扩增出单条带者为变形链球菌，见表1。