《表1 Rc AP基因特异性引物》

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《矮秆蓖麻天冬氨酸蛋白酶基因的克隆、表达及蛋白纯化》

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根据NCBI数据库中登录的Rc AP基因编码区序列号（XM＿015725812.1），用Snape Gene 3.2.1软件设计双引物，Rc AP基因特异性引物见表1。使用高保真酶Prime STAR提取矮秆蓖麻六叶期叶片总RNA，反转录为c DNA，以其为模板，Rc AP-F为上游引物，Rc AP-RS为下游引物扩增带有酶切位点XhoⅠ的目的片段，以Rc AP-Fs为上游引物，Rc AP-R为下游引物扩增带有酶切位点NcoⅠ的目的片段。反应条件为：94℃预变性5 min；94℃30 s，55℃45 s，72℃60 s，共30个循环；72℃延伸10 min。PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳分析后，切胶回收目的片段。