《表1 Of SPLs基因克隆引物》

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《桂花OfSPLs基因克隆及其在不同温度下花芽分化时期的表达分析》

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OfSPL：桂花SQUAMOSA promoter-binding protein-like（SPL）基因；下同

基于'堰虹桂'转录组数据库筛选得到10个OfSPL基因Unigene片段，运用Primer Premier 6.0引物设计软件设计特异引物（表1），由上海捷瑞生物工程有限公司合成。PCR扩增反应体系为：Premix Taq酶（Ta Ka Ra，大连） 10μL，c DNA模板和上下游引物（10μmol/L）各1μL，dd H2O补至20μL。反应程序为：95℃预变性5 min；95℃变性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸1 min，35个循环；72℃延伸10min。将PCR产物于质量分数1%琼脂糖凝胶电泳后，切胶回收，然后与p MD18-T载体连接并转化大肠杆菌（Escherichia coli） DH5α感受态细胞，涂板后进行蓝白斑筛选，最后经PCR鉴定后送上海生工生物工程股份有限公司测序。