《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

《表1 实时荧光定量PCR引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《尾加压素Ⅱ在高糖诱导心肌细胞氧化应激、内质网应激中的作用及机制研究》


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注:GRP78:葡萄糖调节蛋白78;ATF6:活化转录因子6;CHOP:CCAAT/增强子结合同源蛋白;caspase-12:半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12;GAPDH:甘油醛-3-磷酸脱氢酶;F:上游引物;R:下游引物

按说明用TRIzol提取心肌细胞总RNA,并用紫外分光光度计在260 nm下测量并计算RNA的浓度及纯度。根据TAKa Ra逆转录试剂盒说明,将RNA逆转录为互补DNA(c DNA)。采用Promega的SYBR?GreenⅠ在荧光定量PCR仪上扩增,建立标准曲线,反应步骤:95℃,10 s,35个循环,62℃退火10 s;72℃延伸10 s进行PCR扩增,在每个循环的延伸期收集荧光信号,并通过熔解曲线分析PCR扩增的特异性。所获数据通过2-ΔΔCt法进行处理,引物序列见表1。