《表2 常见长期负性情绪应激（抑郁）大鼠动物模型的特点》

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《“长期负性情绪积累肝失疏泄加速脑老化进程”假说的思考和探索》

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在间接电击法制备单一愤怒情绪大鼠模型基础上，课题组继而改良并优化了多情交织作用下的复合长期负性情绪应激大鼠动物模型[21]。鉴于常见慢性负性情绪应激造模方法如慢性束缚法造模时间长且可能对动物本身产生躯体应激[22，23]、空瓶应激法所诱发的情绪重复性低、居住入侵（社交失败）法造模成功率低[23]等缺点，而慢性轻度不可预知性心理应激（Chronic unpredictable mild stress，CUMS）造模方法可通过给予大鼠温和、随机和长期不同的应激因子而较好诱发和模拟人类的慢性长期抑郁状态[24]（表2）。因此课题组选用改进的CUMS诱导方法[25-27]，并创新将其中易产生躯体应激的直接电击和禁食禁水等刺激分别替代为慢性不可预知性心理应激因子间接电击和惩罚性饮水[28]、将每种心理应激刺激时间稍微延长以更好诱发抑郁情绪并最大程度减少可能引起的焦虑因子[29]，最终将CUMS模型综合改进为下述8种不同的心理应激因子，实验过程中每天随机序贯对应激组大鼠施以其中的一种[30，31]:（1）束缚：使用束缚筒束缚大鼠6 h·天-1；（2）温水游泳：15 min·天-1；（3）间接电击刺激攻击鼠：15 min·天-1，频率为1-2次·min-1；（4）强光刺激：5 h·天-1，照明频率为300闪光·min-1；（5）摇晃：设置振荡器30 min，频率160次·min-1；（6）潮湿垫料：12 h；（7）噪声：3 h·天-1，强度为90 d B；（8）惩罚性饮水：10 min·天-1等，持续造模4周后结果发现：应激组大鼠目光无神，毛发零乱，摄水摄食量明显减少，头部蜷缩在身体中，夜间不时发出细声尖叫，以上表情行为较好符合长期负性情绪抑郁状态。此方法充分借鉴了上述间接电击法的造模优势，合理控制了躯体刺激成分，并将心理应激因子随机序贯干预且使单一应激因子的作用时间稍微延长，较为适用于制备长期负性情绪应激抑郁大鼠模型。