《表3 不同破壁方法细胞破壁率和相应RNA提取效果比较》

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《环磷酸腺苷生产酵母菌株不同阶段RNA的提取改进》

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注:*表示由于破壁率过低而未进行后续提取操作；-表示未检出

如前言所述，细胞壁的有效破碎和RNA完整性之间是一个矛盾；而DNA污染问题则可以通过DNase消化解决。因此，本文首先尝试从提高细胞破壁率的角度来改进36 h和60 h细胞的RNA提取效果。参考文献[1-4]选择珠打法（bead beating）、液氮碾磨、反复冻融、超声波破碎和加玻璃珠涡旋振荡5种方法，首先检查对60 h细胞的破壁效果，然后结合使用破壁步骤和试剂盒提取RNA。由表3和图5可知，以破壁率来说，珠打方法破壁效果最好，玻璃珠涡旋振荡和液氮研磨次之；反复冻融和超声波破碎方法过低，放弃进一步考察；对所得破碎细胞液进一步进行RNA提取操作，玻璃珠涡旋振荡方法不仅得率低，RNA完整性也较珠打和液氮研磨方法差。综上，选择珠打破壁法用于后续的实验。