《表1 各因子正反向引物序列》

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《Vδ1 T细胞和TINs细胞表达情况与宫颈癌患者临床分期及预后的关系》

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取病理活检宫颈癌癌组织，采用实时荧光定量PCR法测定所有标本组织中炎性细胞因子（IL-11、IL-8、IL-18）以及趋化因子（CCL2、CCL5、CXCL10)m RNA表达水平。首先参照总RNA提取试剂盒说明书使用方法提取组织中总RNA，然后采用mi RNA专用逆转录试剂盒进行mi RNA逆转录，10μl的反应体系组成主要包括：2.0μl Prime Scrip缓冲液，0.5μl RT酶，0.5μl引物，5.0μl RNA，1.5μl RNase Free dH2O等。在37℃15 min、85℃5 s反应条件下反应一段时间后进行实时荧光定量PCR。其中采用Prime 5.0设计的引物如表1。PCR反应条件：95℃30 s，95℃5 s，60℃35 s，95℃15 s，连续40个循环。然后根据内参采用2-△△ct分别计算各m RNA相对表达量（RQ)[7]。